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    多糖中糖組成測定的方法有很多,常用的方法是:

    1)  氣相色譜法(GC)

    但該方法需要衍生化才能使單糖揮發。氣相色譜法可以對單糖的組成進行高質量的分析,特別是與質譜聯用(GC-MS),

    單糖組成.jpg

    從而提供更好的分辨率和靈敏度。雖然質譜法可以很容易地將碳水化合物與其他有機化合物區分開來,但由于衍生單糖的高重現性,通過火焰離子化檢測器(FID)定量被更頻繁地用于測量衍生單糖的數量。然而,為了量化單糖,必須確保衍生化是完全的,以避免分析糖的損失或降解。此外,一些單糖如糖醛酸很難衍生化,這在某些情況下阻礙了氣相色譜法的準確定量。該方法的另一個缺點是,同一單體可能呈現不同的衍生形式,從而呈現同一分子的多個光譜,使分析變得復雜。博睿糖生物免費提供柱前衍生化,數據穩定,重復性好。

    單糖組成.jpg

    2)  高效液相色譜(HPLC)

    GC相比,這節省了樣品制備的時間,因為不需要衍生化步驟。高效液相色譜根據分子的電荷和極性來分離。然而,就單糖組成而言,極性是實現分離的主要機制,這種方法降低了色譜分辨率,導致在處理復雜混合物時存在偏差。例如,兩種具有相似極性或結構的不同化合物(木糖和半乳糖)可以因此被共洗脫。

          3)高效陰離子交換色譜(HPAEC)

    這種方法提供了最常見的單糖的高分辨率分析,不需要衍生化步驟。根據pKa的差異分離單糖。博睿糖生物提供的該方法中,涵蓋16種單糖標準品,包含酸性糖、中性糖、氨基糖。免費提供前處理過程,給出樣品中單糖組成,包括游離糖、結合糖。且該方法為博睿糖生物工程師的首推方法。

          4)核磁共振方法確定單糖

             基于核磁共振(NMR)系統的使用不同的方法已經發展到多糖的定量。使用1H NMR可以識別和量化主要多糖的陰離子單體組成?;诨瘜W移位選擇性過濾和全相關光譜(CSSF-TOCSY)序列的其他核磁共振方法,即使是單體(葡萄糖)、二聚體(蔗糖)或三聚體(棉子糖),也可以在不經過預處理的情況下,在水介質中同時區分22種不同的糖類。這些方法雖然快速、靈敏、高效,但由于它們需要廣泛的分析設備和非常有經驗的人員,因此仍然相當昂貴和復雜。




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